Sa kimika, ang pagbabanto ay ang proseso ng pagbawas ng konsentrasyon ng isang sangkap sa isang solusyon. Ang paghalo ng kadena ay ang paulit-ulit na pagbabanto ng isang solusyon upang mabilis na madagdagan ang kadahilanan ng pagbabanto. Ang pamamaraang ito ay karaniwang ginagawa sa mga eksperimento na nangangailangan ng napaka-dilute na mga solusyon na may mataas na kawastuhan. Halimbawa ng mga eksperimento na kinasasangkutan ng mga curve ng konsentrasyon sa isang logarithmic scale o mga eksperimento upang matukoy ang density ng bakterya. Ang mga dilution ng kadena ay malawakang ginagamit sa mga eksperimentong pang-agham tulad ng biochemistry, microbiology, pharmacology, at physics.
Hakbang
Paraan 1 ng 2: Pagsasagawa ng Pangunahing Dilusi
Hakbang 1. Tukuyin ang naaangkop na solusyon sa diluent
Napakahalaga upang matukoy ang likidong gagamitin para sa pagbabanto. Maraming solusyon ang natutunaw sa dalisay na tubig, ngunit hindi palaging ganito. Kung nagpapalabnaw ka ng bakterya o iba pang mga cell, gawin ito sa isang medium ng kultura. Ang likidong pinili mo ay magagamit para sa lahat ng mga dilutions ng kadena.
Kung may pag-aalinlangan tungkol sa kung aling diluent ang gagamitin, humingi ng tulong o tumingin sa online. Maghanap ng mga halimbawa mula sa iba na nakagawa ng katulad na mga kadena ng kadena
Hakbang 2. Maghanda ng isang bilang ng mga test tubes na naglalaman ng 9 ML ng diluent
Ginagamit ang mga test tubes para sa mga walang laman na dilutions. Una, ilagay ang undiluted sample sa unang tubo, pagkatapos ay gawin ang mga dilutions na magkakasunod sa susunod na mga tubo.
- Lagyan ng label ang lahat ng ginamit na tubes bago simulan ang pagbabanto upang hindi ka malito sa oras na tumakbo ang eksperimento.
- Ang bawat tubo ay puno ng 10 dilutions, simula sa tubo na ang sangkap ay hindi pa natutunaw. Ang pagbabanto sa unang tubo ay 1:10, na sinusundan ng 1: 100 sa pangalawang tubo, 1: 1000 para sa pangatlo, at iba pa. Tukuyin ang dami ng pagbabanto na dapat na isagawa nang maaga, upang hindi mo masayang ang natutunaw na solusyon.
Hakbang 3. Maghanda ng isang pagsubok na tubo na naglalaman ng hindi bababa sa 2 ML ng undiluted na solusyon
Ang minimum na halaga ng solusyon na dapat na dilute kinakailangan upang maisagawa ang kadena na pagbabanto ay 1 ML. Kung gagamit ka lamang ng 1 ML, wala nang natitirang solusyon na natitira. Lagyan ng label ang BLM para sa mga hindi naitala na solusyon.
Paghaluin nang lubusan ang solusyon bago simulan ang anumang pagbabanto
Hakbang 4. Gawin ang unang pagbabanto
Kumuha ng 1 ML ng undiluted solution mula sa BLM test tube na may pipette at ilagay ito sa isang test tube na may label na 1:10 na naglalaman ng 9 ML ng diluent, pagkatapos ay ihalo nang lubusan. Mayroon na ngayong 1 ML ng hindi nabuong solusyon sa 9 ML ng diluent. Kaya, ang solusyon ay na-dilute ng isang kadahilanan ng pagbabanto ng 10.
Hakbang 5. Gawin ang pangalawang pagbabanto
Para sa pangalawang pagbabanto, kumuha ng 1 ML ng solusyon mula sa 1:10 tube, pagkatapos ay ilagay ito sa 1: 100 tube na naglalaman din ng 9 ML ng diluent. Tiyaking ang solusyon sa 1:10 tube ay ganap na halo-halong bago idagdag ito sa susunod na tubo. Muli, siguraduhin na ang pagbabanto sa 1: 100 na tubo ay ganap na halo-halong. Ang solusyon mula sa 1:10 tube ay pinaliit ng 10-fold sa 1: 100 tube.
Hakbang 6. Ipagpatuloy ang pamamaraang ito upang maisagawa ang mas mahaba ang mga dilutions ng kadena
Ang prosesong ito ay maaaring ulitin nang maraming beses kung kinakailangan upang makuha ang nais na konsentrasyon ng solusyon. Sa mga eksperimento gamit ang mga curve ng konsentrasyon, maaari kang magsagawa ng mga dilutions ng kadena upang makabuo ng isang bilang ng mga solusyon na may mga dilutions na 1, 1:10, 1: 100, 1: 1,000.
Paraan 2 ng 2: Kinakalkula ang Kadahilanan ng Pag-aalis at Huling Konsentrasyon
Hakbang 1. Kalkulahin ang ratio ng huling dilution sa kadena na pagbabanto
Ang kabuuang ratio ng dilution ay maaaring matukoy sa pamamagitan ng pag-multiply ng factor ng dilution mula sa bawat hakbang hanggang sa huling hakbang. Ang paglalarawan ng matematika ay kasama ang pormula Dt = D1 x D2 x D3 x… x D , Dt ay ang kabuuang kadahilanan ng pagbabanto at D ay ang diluent ratio.
- Halimbawa, sabihin nating gumawa ka ng isang 1:10 dilution 4 na beses. I-plug ang diluent factor sa pormula: Dt = 10 x 10 x 10 x 10 = 10,000
- Ang diluent factor sa ika-apat na tubo sa kadena na ito ay 1: 10,000. Ang konsentrasyon ng sangkap pagkatapos ng pagbabanto ay 10,000 beses na mas mababa kaysa bago ito lasaw.
Hakbang 2. Tukuyin ang konsentrasyon ng solusyon pagkatapos ng pagbabanto
Upang matukoy ang pangwakas na konsentrasyon ng isang solusyon pagkatapos ng isang pagbabanto ng kadena, dapat mong malaman ang paunang konsentrasyon nito. Ang pormula ay Cmagtapos = Csimula/ D, Cmagtapos ay ang pangwakas na konsentrasyon ng natutunaw na solusyon, Csimula ay ang paunang konsentrasyon ng orihinal na solusyon, at ang D ay ang paunang natukoy na ratio ng pagbabanto.
- Halimbawa: Kung nagsimula ka sa isang solusyon sa cell na ang konsentrasyon ay 1,000,000 na mga cell bawat mL at ang ratio ng pagbabanto ay 1,000, ano ang pangwakas na konsentrasyon ng natutunaw na sample?
-
Sa pamamagitan ng paggamit ng formula:
- Cmagtapos = Csimula/ D
- Cmagtapos = 1.000.000/1.000
- Cmagtapos = 1000 cells bawat mL.
Hakbang 3. Siguraduhin na ang lahat ng mga yunit ay pareho
Kapag gumaganap ng anumang pagkalkula, tiyakin na ang mga yunit ay palaging pareho sa pagtatapos ng pagkalkula. Kung ang paunang yunit ay mga cell bawat mL, tiyaking mananatiling pareho ang mga yunit sa pagtatapos ng pagkalkula. Kung ang paunang konsentrasyon ay mga bahagi bawat milyon (bpd), kung gayon ang pangwakas na konsentrasyon ay dapat ding nasa mga yunit ng bpj.
